關于雞ELISA試劑盒，那些不得不說的事
發布時間：2021-09-15 點擊次數：357次
雞ELISA試劑盒溶菌酶可與等電點較低的蛋白有強的結合能力。免疫球蛋白等電點約為5，因此，在雙抗體夾心法ELISA試劑盒測定中，溶菌酶可在包被的IgG和酶標的IgG間形成橋接，從而導致假陽性。因此，為保證ELISA試劑盒測定的可靠性，有必要從標本中去除溶菌酶或將其封閉，Cu2+離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶，防止其連接IgG。
Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
雞ELISA試劑盒由補體引起的干擾可通過下述方法避免：
?。?）對臨床血清標本加熱滅活補體：采用56~C30 min加熱可使標本中的補體C1。滅活。
?。?）包被或酶標二抗使用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補體系統，因此，使用特異的雞抗體，不會出現因補體激活而存在的假陽性和假陰性干擾。
異嗜性抗體人類血清中含有抗嚙齒類動物（如鼠、馬、羊等）的免疫球蛋白（1g）的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研究表明，天然的異嗜性抗體（1gG）可分為兩類，一類（85％的假陽性由其引起）可結合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域，但不與兔IgG的Fab區結合。另一類（15％的假陽性由其引起）可結合于小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區表位結合。異嗜性抗體可通過交聯固相和酶標的單抗或多抗而出現假陽性反應。
雞ELISA試劑盒由異嗜性抗體引起的干擾可通過下述方法避免：
?。?）該試劑盒使用特異的兔F（ab’）2。片段作為固相或測定酶標抗體。
?。?）在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig，封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。
?。?）使用靶特異的非Ig親和蛋白替代固相或酶標抗體之一。采用噬菌體展示技術展示來自單個金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）聯合文庫的人IgA結合親和蛋白，用于IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。
?。?）使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。
